Аналіз ПЛР: що це таке? Діагностика і розшифровка аналізу плр

Інноваційним методом діагностики, який дозволяє виявляти різні інфекції, приховані і спадкові захворювання людини, є плр аналіз: що це таке від того і не знають деякі, кому він показаний по тим або іншим причинам.

Зміст

  • 1 Сутність нового методу молекулярного
  • 2 Підготовка перед аналізом — запорука безпомилкової оцінки біо матеріалу
  • 3 Розшифровка показників
  • 4 Обстеження вагітних
  • 5 Обстеження на приховані патології
  • 6 Діагностування ВІЛ збудника

Аналіз плр належить до числа сучасних методів молекулярної біології, де абревіатура плр означає буквально наступне – полімеразної ланцюгової реакції. Отже, що це таке – плр аналізи, далі буде освітлено докладніше.

Суть нового методу молекулярного

За допомогою методу плр намагаються домогтися збільшення незначній концентрації деяких сегментів нуклеїнової кислоти з відібраної порції біо матеріалу (або проби). Основою дослідження є виборче багаторазове копіювання (ампліфікація) відрізка ДНК за допомогою ферментів в умовах медичної лабораторії.

Відкриття полімеразної ланцюгової реакції належить Кері Мюлису (83 г), завдяки чому хімік заробив подяку у вигляді Нобелівської премії (93 р).

генетичний код на молекулярному рівні

В ході дослідження біо матеріалу методом плр застосовують особливу установку — ампліфікатор. У сучасному обладнанні передбачена можливість встановлення спеціальної установки для нагрівання та охолодження пробірок щоб уникнути появи помилкових даних діагностики.

В ході проведення дослідження послідовно змінюють три стадії — денатурацию, відпал, элонгацию. При цьому кожна включає 25-30 повторів.

Переваги інноваційної діагностики

Проведення діагностики на виявлення інфекційних захворювань за методом плр досить затребуване в сучасному суспільстві. Плюсами такого обстеження є:

  1. Пошук збудника інфекції вилученої і збільшилася за часів порції матеріалу. Результат обстеження дозволяє побачити наявність або відсутність РНК/ДНК збудника захворювання.
  2. Майже виключаються помилкові і не точні реакції.
  3. Метод плр є високочутливим. Іншими словами даний аналіз дозволяє побачити навіть клітини збудника інфекції, що знаходяться в однині.
  4. Результат на латентну форму збудника буває готовий через 4 год з моменту проведення обстеження.

Можна визначити інфекційних збудників і без наявної симптоматики захворювання. Крім цього плр аналіз проводять і за одужання після перенесеного інфекційного або вірусного захворювання.


Зараз методи плр діагностики розвиваються швидкими темпами, перебуваючи в постійному удосконаленні. Виникають деякі підвиди обстеження.

Основа медичної методики

пробірки для аналізу плрАналіз плр призначений для проведення виключно в стінах лабораторії. Щоб виконати його умови, потрібно збільшити в кілька разів будова РНК/ДНК людини. При цьому повинно утворитися стільки РНК/ДНК, скільки потрібно для проведення візуальної оцінки.

Під час процедури створюється копія відрізка РНК/ДНК, що відбирається за заданим умовам. Для цього ведеться ціла база даних, з якою порівнюють будову різних інфекційних складових. ПЛР аналіз дозволяє не тільки розпізнати збудника, але і провести його кількісну оцінку.

Області застосування методики

Даний вид діагностики використовується різними областями медицини:

  •  з його допомогою можна проводити обстеження на предмет ідентифікації генетичного матеріалу людини — волосся, крові або слини;
  •  взяття крові для плр аналізу буває необхідно в разі генотипування (наприклад, для з’ясування індивідуальної генетичної реакції на ліки);
  •  метод допомагає встановити родинні залежності людини, тобто визначити його коріння;
  •  найбільшу поширеність метод молекулярної ДНК і РНК діагностики отримав в медицині для встановлення факту різних інфекційних патологій.

Підготовка перед аналізом — запорука безпомилкової оцінки біо матеріалу

Щоб плр аналіз показав достовірний результат, необхідно правильно підготуватися до процедури забору біо матеріалу. Важливо дотримуватися наступних рекомендацій:

  1. Якщо необхідно здати слину, то від прийому ліків і гастрономічних продуктів варто утриматися мінімум за 4 години до взяття матеріалу. Результат буде точним, якщо перед взяттям мазка з внутрішньої поверхні щоки рот попередньо прополоскати чистою водою і виконати легкі масажні рухи на шкірі, сприяють рясному слиновиділенню.
  2. Призначення урогенітального мазка у будь-якої людини (і у чоловіків і у жінок) передбачає дотримання статевого спокою протягом 3-х діб. За тиждень до походу в лабораторію не можна користуватися будь-якими засобами інтимної гігієни (свічками, гелями, мазями, кремами), спринцюватися. За пару тижнів необхідно виключити прийом антибіотиків. У жінок в період менструації мазок не беруть, це стає можливим лише через 3 доби після припинення менструальної кровотечі. Приблизно за 3 години до забору матеріалу повинен відзначатися останній епізод сечовипускання.
  3. Збір сечі можна виконати попередньо будинку. Перед цим проводять ґрунтовну гігієнічну очистку зовнішніх статевих органів. Вже після цього порцію сечі в обсязі 50-60 мл збирають у спеціальний пластиковий контейнер. Жінкам заборонено здавати сечу під час менструації. Важливо стежити за якістю і чистотою зібраного матеріалу. Для чого чоловікам рекомендується відтягувати шкірну складку, а жінкам закривати піхву звичайним гігієнічним тампоном.
  4. Здача сперми у чоловіків припускає статевий спокій впродовж 3 діб. Крім того медики настійно не рекомендують у цей час приймати процедури, що супроводжуються впливом на тіло високих температур (будь то ванна з гарячою водою або відвідування сауни), вживати спиртні напої і їсти гострі страви.


Утриматися від сечовипускання доведеться також протягом 3 годин до процедури.

Розшифровка показників

Інтерпретує отриманий результат доктор, який направив на обстеження.

Взяти на руки бланк з аналізом можна вже на наступний день, і в ньому може бути відображено одне з двох можливих висновків:

  •  негативний результат — є показником того, що шуканий збудник інфекції у досліджуваній пробі не виявлено;
  •  позитивний результат — дозволяє дати підтвердження, що у людини є РНК/ДНК збудника інфекції в організмі.

лаборант розшифровує дані аналізу

При цьому цілком допускається ситуація, коли при відсутності зовнішніх проявів захворювання результат виявляється позитивним. Таке можливо зазвичай або на самому початку розвитку захворювання, або при звичайному носійстві збудника інфекції. Якщо виявлено друге, проведення лікувальних заходів планують не завжди. Обмежуються тим, що наказують регулярно відвідувати профільного спеціаліста. Наприклад, це буває в ситуації наявності інфекційних збудників:

  •  папіломавірусу;
  •  герпеса, тощо

Нерідко їх знаходять у мазку з уретри, цервикса або в слині.

При цьому важливо розуміти, що ризик зараження здорової людини інфекційних носієм є досить високий, навіть якщо хвороба не доставляє останньому незручності. Необхідність проведення лікувальної терапії та її інтенсивність у випадку з позитивним результатом визначає лікуючий лікар.

Розшифровка аналізу плр містить і кількісні характеристики. Орієнтуючись на кількісні показники доктор визначає ступінь активності патологічного процесу, коригує стадію розвитку хвороби. На основі аналітичних даних з результату фахівець веде добірку лікувального препарату і визначається з потрібною дозуванням ліки.

Обстеження вагітних

вагітна жінка на обстеженні у лікаря

Оскільки ЗПСШ представляють реальну загрозу для розвитку плоду (аж до викидня, передчасних пологів і вад розвитку) майбутнім породіллям призначають обстеження на ранніх термінах вагітності, виконати його потрібно до 12 тижнів. Мазок на аналіз беруть спеціальною щіточкою з шийкового каналу матки. Ні для жінок, ні для малюка процедура не представляє небезпеки. Дане комплексне дослідження у вагітних іменують ПЛР-6.

Обстеження на приховані патології

При підозрі у людини на наявність ІПСШ йому наказують обстежитися, для чого потрібно здати кров на приховані інфекції. Приймати приховану (латентну) форму можуть наступні збудники:

  • уреаплазми;
  • хламідії;
  • гонококи;
  • гарднерели;
  • мікоплазми тощо

Виявлення латентного характеру захворювання ППП сприяє популярний нині комплексний аналіз плр 12. Для виконання діагностики роблять забір мазка із статевих шляхів. Результати бувають готовими через 2 доби.

Діагностування ВІЛ збудника

Достовірність методики при визначенні ВІЛ інфекції становить 96-98%. В інших 2-4% розшифровка містить хибнопозитивний результат. Здачу аналізів плр призначають особам, чий результат ІФА виявився хибнонегативних. Він може вказувати на те, що у людини ще не сформувалися в потрібній кількості антитіла до вірусу, і без суттєвого збільшення їх виявлення не представляється можливим.

у крові інфекція ВІЛ

Аналіз призначають дітям першого року життя, мами яких мають ВІЛ-позитивний статус.

Дана молекулярна діагностика цінна тим, що дозволяє виявити захворювання ще на стадії зараження. Метод плр постійно вдосконалюється, завдяки чому вартість його стає доступною для багатьох верств населення.